光学显微镜的使用方法

光学显微镜的使用方法

（一）准备
将显微镜小心地从镜箱中取出（移动显微镜时应以右手握住镜壁，左手托住镜座） ，放置在实验台的 偏左侧，以镜座的后端离实验台边缘约 6～ 10cm 为宜。首先检查显微镜的各个部件是否完整和正常。如果 是镜筒直立式光镜，可使镜筒倾斜一定角度（一般不应超过 45 度）以方便观察（观察临时装片时禁止倾 斜镜臂）。

（二）低倍镜的使用方法

1、对光：打开实验台上的工作灯（如果是自带光源显微镜，这时应该打开显微镜上的电源开关） ，转 动粗调螺旋，使镜筒略升高（或使载物台下降） ，调节物镜转换器，使低倍镜转到工作状态（即对准通光 孔），当镜头完全到位时，可听到轻微的扣碰声。
打开光圈并使聚光器上升到适当位置（以聚光镜上端透镜平面稍低于载物台平面的高度为宜） 。然后 用左眼向着目镜内观察（注意两眼应同时睁开） ，同时调节反光镜的方向（自带光源显微镜，调节亮度旋 钮），使视野内的光线均匀、亮度适中。
2 、放置玻片标本：将玻片标本放置到载物台上用标本移动器上的弹簧夹固定好（注意：使有盖玻片 或有标本的一面朝上） ，然后转动标本移动器的螺旋，使需要观察的标本部位对准通光孔的中央。
3、调节焦距：用眼睛从侧面注视低倍镜，同时用粗调螺旋使镜头下降（或载物台上升） ，直至低倍镜 头距玻片标本的距离小于 0.6cm（注意操作时必须从侧面注视镜头与玻片的距离，以避免镜头碰破玻片） 。 然后用左眼在目镜上观察，同时用左手慢慢转动粗调螺旋使镜筒上升（或使载物台下降）直至视野中出现 物像为止，再转动细调螺旋，使视野中的物像最清晰。
如果需要观察的物像不在视野中央，甚至不在视野内，可用标本移动器前后、左右移动标本的位置， 使物像进入视野并移至中央。 在调焦时如果镜头与玻片标本的距离已超过了 1cm 还未见到物像时， 应严格 按上述步骤重新操作。

（三）高倍镜的使用方法

1 、在使用高倍镜观察标本前，应先用低倍镜寻找到需观察的物像，并将其移至视野中央，同时调准 焦距，使被观察的物像最清晰。

2、转动物镜转换器，直接使高倍镜转到工作状态（对准通光孔） ，此时，视野中一般可见到不太清晰 的物像，只需调节细调焦螺旋 ,一般都可使物像清晰。
请注意：
（ 1 ）在从低倍镜准焦的状态下直接转换到高倍镜时，有时会发生高倍物镜碰擦玻片而不能转换到位 的情况（这种情况，主要是高倍镜、低倍镜不配套，即不是同一型号的显微镜上的镜头） ，此时不能硬转， 应检查玻片是否放反、低倍镜的焦距是否调好以及物镜是否松动等情况后重新操作。如果调整后仍不能转 换，则应将镜筒升高（或使载物台下降）后再转换，然后在眼睛的注视下使高倍镜贴近盖玻片，再一边观 察目镜视野，一边用粗调螺旋使镜头极其缓慢地上升（或载物台下降） ，看到物像后再用细调螺旋准焦。
（ 2 ）由于制造工艺上的原因，许多显微镜的低倍镜视野中心与高倍镜的视野中心往往存在一定的偏 差（即：低倍镜与高倍镜的光轴不在一条直线上） ，因此，在从低倍镜转换高倍镜观察标本时常会给观察 者迅速寻找标本造成一定困难。为了避免这种情况的出现，帮助观察者在高倍镜下能较快找到所需放大部 分的物像，可事先利用羊毛交叉装片标本来测定所用光镜的偏心情况，并绘图记录制成偏心图。具体操作 步骤如下：① 用在高倍镜下找到羊毛交叉点并将其移至视野中心；②  换低倍镜观察羊毛交叉点是否还位 于视野中央，如果偏离视野中央，其所在的位置就是偏心位置；③ 将前面两个步骤反复操作几次，以找 出准确的偏心位置，并绘出偏心图。当光镜的偏心点找出之后，在使用该显微镜的高倍镜观察标本时，事 先可在低倍镜下将需进一步放大的部位移至偏心位置处，再转换高倍镜观察时，所需的观察目标就正好在视野中央。

（四）油镜的使用方法

1、用高倍镜找到所需观察的标本物像，并将需要进一步放大的部分移至视野中央。
2、将聚光器升至最高位置并将光圈开至最大（因油镜所需光线较强） 。
3 、转动物镜转换盘，移开高倍镜，往玻片标本上需观察的部位（载玻片的正面，相当于通光孔的位 置）滴一滴香柏油（折光率 1.51）或石蜡油（折光率 1.47）作为介质，然后在眼睛的注视下，使油镜转至工作状态。此时油镜的下端镜面一般应正好浸在油滴中。
4 、左眼注视目镜中，同时小心而缓慢地转动细调螺旋（注意：这时只能使用微调节螺旋，千万不要 使用粗调节螺旋）使镜头微微上升（或使载物台下降） ，直至视野中出现清晰的物像。操作时不要反方向 转动细调节螺旋，以免镜头下降压碎标本或损坏镜头。
5、油镜使用完后，必须及时将镜头上的油擦拭干净。操作时先将油镜升高 1cm，并将其转离通光孔， 先用干擦镜纸揩擦一次，把大部分的油去掉，再用沾有少许清洁剂或二甲苯的擦镜纸擦一次，最后再用干 擦镜纸揩擦一次。至于玻片标本上的油，如果是有盖玻片的永久制片，可直接用上述方法擦干净；如果是无盖玻片的标本，则盖玻片上的油可用拉纸法揩擦，即先把一小张擦镜纸盖在油滴上，再往纸上滴几滴清 洁剂或二甲苯。趁湿将纸往外拉，如此反复几次即可干净。

使用显微镜应注意的事项

1 、取用显微镜时，应一手紧握镜臂，一手托住镜座，不要用单手提拿，以避免目镜或其它零部件滑落。
2、在使用镜简直立式显微镜时，镜筒倾斜的角度不能超过 450，以免重心后移使显微镜倾倒。在观察带有液体的临时装片时，不要使用倾斜关节，以避免由于载物台的倾斜而使液体流到显微镜上。
3、不可随意拆卸显微镜上的零部件，以免发生丢失损坏或使灰尘落入镜内。
4 、显微镜的光学部件不可用纱布、手帕、普通纸张或手指揩擦，以免磨损镜面，需要时只能用擦镜 纸轻轻擦拭。机械部分可用纱布等擦拭。
5 、在任何时候，特别是使用高倍镜或油镜时，都不要一边在目镜中观察，一边下降镜筒（或上升载 物台），以避免镜头与玻片相撞，损坏镜头或玻片标本。
6、显微镜使用完后应及时复原。先升高镜筒（或下降载物台） ，取下玻片标本，使物镜转离通光孔。 如镜筒、载物台是倾斜的，应恢复直立或水平状态。然后下降镜（或上升载物台） ，使物镜与载物台相接 近。垂直反光镜，下降聚光器，关小光圈，最后放回镜箱中锁好。
7 、在利用显微镜观察标本时，要养成两眼同时睁开，双手并用（左手操纵调焦螺旋，右手操纵标本 移动器）的习惯，必要时应一边观察一边计数或绘图记录。